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분자생물학실험10

분자생물학실험강의-동물세포 배양 분자생물학실험-동물세포배양(cell culture) 00.00 음성: CO2 인큐베이터에 배양중인 세포주를 꺼냅니다. CO2 인큐베이터는 온도와 기체의 손실을 막기 위해서 2중문으로 되어 있습니다. 00.15 자막: 온도는 37℃, CO2 농도는 5%를 유지하고 있습니다. 00.25음성: 배양중인 세포의 상태를 현미경으로 확인합니다. 배양액에 둥둥 떠다니거나 곰팡이에의 오염 등은 없는지도 확인합니다.자막: 바닥에 붙어 자라는지, 너무 조밀하지 않은지 등을 체크. 00.49음성: 배양액 용기와 배지 용기 등을 70% 알코올을 뿌려 소독해줍니다. 01.02 음성: 클린벤치의 모습입니다. 사용하지 않는 중에는 UV lamp를 켜둡니다.자막: UV lamp를 켜두는 이유: UV 광선이 닿는 곳에 있는 미생물들을.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-HPLC 분자생물학실험-HPLC 00.00 음성: HPLC 기기의 모습입니다. 00.07음성: 시료의 용출 모습을 볼 수 있고, 실험조건을 입력하는 프로그램 화면입니다. 00.22음성: HPLC도 크로마토그래피인데 이동상으로는 A C N 과 물 2 종류를 사용합니다. 00.38음성: 화면에 컴퓨터로 입력한 조건이 표시되면서 실행이 되는 부분입니다. 00.54 음성: 수동으로 기기 안의 공기를 빼내고 용매도 빼내는 부분입니다. 01.06 음성: 인젝터 부분인데 분석물을 기기 안으로 주입하는 부분입니다. 주입한 분석물은 컬럼을 통과하게 됩니다. 01.20음성: 이 부분은 시료를 필터하고, 관 안의 공기를 제거해주는 부분입니다. 01.30음성: 시료가 컬럼을 지나가게 되는데 시료를 대용량으로 정제할 때는 큰 컬럼을 사.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-SDS PAGE 분자생물학실험-SDS PAGE 00.00 음성: SDS PAGE를 위한 실험대 모습입니다. 00.08 음성: 젤을 만들기 위해 캐스터라 불리는 조립하는 과정입니다. 각 판을 조립할 때 빈틈이 생기지 않도록 각 부분을 잘 조여주고 바닥면이 평평하게 하는 것이 중요합니다. 이때 나사를 너무 세게 조이면 판이 깨질 수 있으므로 주의해야 합니다. 조립한 두 개의 판 사이에 납작한 틈이 생기는 데 이곳에 시료를 부어주어 젤을 만들게 됩니다. 02.03음성: 젤을 구성하는 시약을 하나씩 빈 튜브에 넣어줍니다. 여기에 쓰이는 실험재료들은 강력한 발암물질이므로 꼭 보호장갑을 끼고 실험해야 합니다. 시약중에 TEMED(티미디)를 가장 늦게 넣어주는 것이 일반적인데 이 시약이 들어가는 순간부터 시약들이 중합반응이 시작되어.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-DNA 전기영동 분자생물학실험-DNA 전기영동 00.00 음성: DNA 전기영동을 위한 준비를 시작합니다. 00.05 음성: 아가로스 분말 적정량을 무게를 잰 후 삼각플라스크에 넣어줍니다. TAE 버퍼를 적정량 삼각플라스크에 넣어줍니다. 00.50음성: 아가로스는 실온에서는 녹지 않습니다. 아가로스를 녹이기 위해서 전자레인지를 이용해서 가열해줍니다. 아가로스가 가열되면 순간 기포가 발생하면서 넘칠 수 있기 때문에 중간 중간 꺼내어서 살짝 흔들어주는 것이 좋습니다. 01.48음성: 가열시킨 아가로스가 식는 동안 DNA 전기영동 젤을 만들 캐스터를 조립합니다. EtBr을 소향 취해서 아가로스 버퍼에 섞어줍니다. 버퍼를 캐스터에 조심스럽게 부어주고 굳기를 기다립니다. 자막: EtBr은 발암물질이므로 손에 닿지 않도록 주의해야.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-단백질 발현 및 정제 분자생물학실험-단백질 발현 및 정제 00.00 음성: plasmid DNA 배양을 위한 실험테이블 모습입니다. 00.07음성: 알코올을 실험테이블과 기구들을 뿌려줍니다. 미생물을 이용하는 실험이지만, 다른 미생물 등에 오염이 생길 수 있기 때문입니다. 00.25음성: 알코올 램프에 불을 붙여줍니다.자막: 방금 실험테이블이나 손에 뿌린 알코올이 채 마르기 전에 라이터를 켜면 안되겠죠! 손이 탑니다. 00.32음성: 핀셋을 알코올 램프에 달궈주어 멸균하는 과정입니다. 멸균된 이쑤시개를 하나 집어줍니다. 00.54 음성: 대장균이 자라있는 고체배지를 들어 콜로니 하나를 신속하게 따 줍니다.자막: 고체배지에 붙어 자라고 있는 콜로니를 멸균된 이쑤시개를 이용해서 액체배지로 옮겨주는 과정. 01.00 음성: 아무것.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-플라스미드 DNA 추출(미니프랩) 분자생물학실험-플라스미드 DNA 추출(미니프랩) 00.00 음성: 플라스미드 DNA 추출 실험을 위한 실험 테이블 모습입니다. 00.08 음성: 우선 밤새 균주를 배양한 배양액을 일부 취해서 원심분리관, E-tube에 옮겨 담습니다. 00.40음성: 균주만을 따로 모으기 위해서 원심분리를 시행합니다. 2개의 튜브를 서로 대칭이 되도록 넣어줍니다.자막: 대장균을 8,000rpm 이상에서 원심분리합니다. 01.41음성: 원심분리가 끝났습니다. 튜브를 꺼내어 확인하면 튜브 바닥에 균주가 침전되어 있는 것을 볼 수 있습니다. 02.00음성: 바닥에 붙은 균주가 필요하므로, 상층액은 폐액통에 버려줍니다.자막: 이 때 상층액을 완전하게 제거하는 것이 이후 실험과정에서의 효율을 높여줍니다. 02.17 음성: 솔루션 .. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-플라스미드 DNA 배양 분자생물학실험-플라스미드 DNA 배양 00.00 음성: plasmid DNA 배양을 위한 실험테이블 모습입니다. 00.07음성: 알코올을 실험테이블과 기구들을 뿌려줍니다. 미생물을 이용하는 실험이지만, 다른 미생물 등에 오염이 생길 수 있기 때문입니다. 00.25음성: 알코올 램프에 불을 붙여줍니다.자막: 방금 실험테이블이나 손에 뿌린 알코올이 채 마르기 전에 라이터를 켜면 안되겠죠! 손이 탑니다. 00.32음성: 핀셋을 알코올 램프에 달궈주어 멸균하는 과정입니다. 멸균된 이쑤시개를 하나 집어줍니다. 00.54 음성: 대장균이 자라있는 고체배지를 들어 콜로니 하나를 신속하게 따 줍니다.자막: 고체배지에 붙어 자라고 있는 콜로니를 멸균된 이쑤시개를 이용해서 액체배지로 옮겨주는 과정. 01.00 음성: 아무.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-라이게이션 및 형질전환 분자생물학실험-라이게이션 및 형질전환 00.00 음성: 라이게이션 및 형질전환 실험을 위한 실험테이블 모습입니다. 00.08 음성: 벡터와 인서트 디엔에이를 소량 취해서 빈 이튜브에 차례대로 넣어줍니다. 라이게이션 버퍼를 세번째로 넣어줍니다. 자막: 벡터는 보통 시약회사에서 구입하거나, 제한효소 처리를 통해서 실험자가 만들 수 있습니다. Insert DNA는 PCR을 한 결과물 등을 이용합니다. 00.55 음성: 라이게이즈 효소는 항상 냉동상태로 두어야 효율이 떨어지지 않습니다. 지금 보이는 노란 용기는 영하 20도 온도로 유지시켜주는 용기이며 여기에 효소 튜브가 보입니다. 자막: 효소는 항상 -20도씨 이하로 보관해야 하며, 실험할 때에도 실온에의 노출은 최대한 피해야 함(실온 노출이 반복되면 효소 활.. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-제한효소 처리 분자생물학실험 - 제한효소 처리 00.00 음성: 제한효소 처리 실험을 위한 실험테이블 모습입니다.자막: 준비물 - 얼음, 파이펫과 팁, E-TUBE, 제한효소, 제한효소버퍼, DNA, 증류수 00.08 음성: 아이스박스에 제한효소, 제한효소버퍼, 제한효소 처리할 DNA 가 각각 들어있는 튜브가 있습니다.자막: 제한효소는 항상 -20도씨 이하로 보관해야 하며, 실험할 때에도 실온에의 노출은 최대한 피해야 함(실온 노출이 반복되면 효소 활성이 점차 저하됨)말풍선: Ns라 적힌 것(제한효소), 가운데 L(제한효소버퍼), 오른쪽D(DNA) (각 튜브에 말풍선 효과 등으로 제한효소 제한효소버퍼 DNA를 화면에 표시 00.15 음성: 파이펫에 팁을 끼운 후, 먼저 제한효소 처리할 DNA 튜브에서 dna를 취해서 .. 2017. 8. 28.
분자생물학실험강의-개요 분자생물학실험-실험강의의 개요 슬라이드 1 실험강의란/실험강의의 필요성 실험강의를 듣는 수험생 여러분을 환영합니다. 이번 레슨에서는 실험강의의 목적과 이를 통해 수험생 여러분이 무엇을 얻을 수 있을지에 관해 말씀드리고자 합니다. 자신이 어떤 공부를 왜 하는지를 정확히 알고 공부한다는 것은 스스로 공부하고자 하는 의지를 줄 수 있고 효율적으로 공부를 할 수 있기 때문에 중요한 과정입니다. 텍스트를 통해 읽혀지는…. 실험강의란, 실제 생물학 실험실에서 쓰여지는 실험을 영상에 담아 구성한 것입니다. 텍스트를 통해 읽혀지는 실험이 아니라 눈으로 보는 강의이기 때문에 더 확실히 기억에 남고 실제 자신이 실험을 하는 듯한 경험을 준다는 장점이 있습니다. 목련책 등의 생물학 기본에서는… 미디트 공부를 시작하면서 접하.. 2017. 8. 28.

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