분자생물학실험-DNA 전기영동
00.00
음성: DNA 전기영동을 위한 준비를 시작합니다.
00.05
음성: 아가로스 분말 적정량을 무게를 잰 후 삼각플라스크에 넣어줍니다. TAE 버퍼를 적정량 삼각플라스크에 넣어줍니다.
00.50
음성: 아가로스는 실온에서는 녹지 않습니다. 아가로스를 녹이기 위해서 전자레인지를 이용해서 가열해줍니다. 아가로스가 가열되면 순간 기포가 발생하면서 넘칠 수 있기 때문에 중간 중간 꺼내어서 살짝 흔들어주는 것이 좋습니다.
01.48
음성: 가열시킨 아가로스가 식는 동안 DNA 전기영동 젤을 만들 캐스터를 조립합니다. EtBr을 소향 취해서 아가로스 버퍼에 섞어줍니다. 버퍼를 캐스터에 조심스럽게 부어주고 굳기를 기다립니다.
자막: EtBr은 발암물질이므로 손에 닿지 않도록 주의해야 합니다. 이 단계에서 EtBr을 넣어주었기 때문에 이 후 모든 실험과정에는 항상 조심해야 합니다.
02.00
음성: 바닥에 붙은 균주가 필요하므로, 상층액은 폐액통에 버려줍니다.
자막: 이 때 상층액을 완전하게 제거하는 것이 이후 실험과정에서의 효율을 높여줍니다.
02.37
음성: 빗처럼 생긴 것을 콤브라고 하는데 젤이 굳은 후 이것을 제거하면 그 부분에 홈이 생겨 그 부분에 DNA를 넣을 수 있게 됩니다.
02.47
음성: 젤이 굳게 되면 도토리 묵처럼 변하게 됩니다. 콤을 제거한 후 젤을 꺼내어 전기영동 탱크에 넣어준 후, 버퍼가 젤 표면을 살짝 덮을 정도로 부어줍니다.
03.30
음성: 미니프렙한 DNA에 전기영동 다이를 섞은 것을 하나씩 젤에 로딩해줍니다. 로딩할 때 유실되지 않도록 조심스럽게 넣어줍니다. 제일 왼쪽 부분에는 마커를 넣어주어 실험을 마치고 DNA 밴드를 관찰할 때 DNA의 크기와 농도를 확인할 수 있도록 합니다.
04.32
음성: 로딩이 끝나면 전기영동 탱크의 커버를 덮고 기기를 작동시켜줍니다.
자막: 100V 이상의 전류가 흐르게 되기 때문에 커버를 덮어주어야 기기가 작동되도록 기기가 제조됨
04.45
음성: 시간이 지나면서 밴드가 아래쪽으로 이동하는 것을 볼 수 있습니다. 아래쪽으로 DNA 밴드가 이동하므로 아래쪽이 (+)극임을 알 수 있습니다. 지금 눈에 보이는 밴드들은 눈으로 관찰할 수 있도록 첨가해준 염색약입니다. DNA는 전기영동이 마친 후 UV 광선을 쬐어주어야만 볼 수 있습니다.
자막: 전기영동이 되는 모습을 보여주기 위해 잠시 커버를 벗긴 것입니다.
05.23
음성: 전기영동이 끝나면 스위치를 끄고 젤을 꺼냅니다.
05.39
음성: 젤을 UV lamp에 올려두고 UV를 켜면 눈으로 DNA 밴드가 보입니다. UV는 플라스틱을 통과하지 못하므로 젤을 담고 있는 젤판도 제거하고 젤 만을 기기에 올려놓습니다. 몸을 보호하기 위해서 플라스틱의 투명한 커버가 있음을 알 수 있습니다.
자막: 투명한 커버를 덮고서 UV를 켜야만 실험자의 눈과 피부 등을 보호할 수 있습니다.
05.56
음성: 맨눈으로는 보이지 않던 DNA 밴드가 UV를 켜게 되면 보이게 됩니다.
자막: 생물학 교재 등에 보이는 DNA 밴드들을 UV lamp가 조사되는 상태에서 촬영을 한 것입니다.
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